一、辐射灭菌法
本法系指灭菌物品置于适合放射源辐射的γ射线或适合的电子加速器发作 的电子束中进行电离辐射而到达杀灭微生物的办法。本法**常用的60Co-γ射线 辐射灭菌。医疗器械、容器、出产辅佐用品、不受辐射损坏的质料药及成品 等均可用本法灭菌。
选用辐射灭菌法灭菌后的产品其SAL应《10-6。γ射线辐射灭菌所操控的参数 主要是辐射剂量（指灭菌物品的吸收剂量）。该剂量的拟定应考虑灭菌物品的 适应性及可能污染的微生物**大数量及**强抗辐射力，事前应验证所运用的剂 量不影响被灭菌物品的安全性、有用性及安稳性。常用的辐射灭菌吸收剂量为 25KGy。对**终产品、质料药、某些医疗器件应尽可能选用低辐射 剂量灭菌。灭 菌前，应对被灭菌物品微生物污染的数量和抗辐射强度进行测定，以评估灭菌 进程赋予该灭菌物品的无菌确保水平。
灭菌时，应选用恰当的化学或物理办法对灭菌物品吸收的辐射剂量进行监控， 以充沛证明灭菌物品吸收的剂量是在规则的极限内。如选用 与灭菌物品一同被 辐射的放射性剂量计，剂量计要置于规则的部位。在初装置时剂量计运用规范 源进行校对，并定时进行再校对。
60Co-γ射线辐射灭菌法常用的生物指示剂为矮小芽孢杆菌孢子(Spores of Bacillus pumilus)。 二、干热灭菌法
本法系指将物品置于干热灭菌柜、地道
灭菌器等设备中，运用干热空气 到达杀灭微生物或消除热原物质的办法。适用于耐高温但不宜用湿热灭菌法 灭菌的物品灭菌，如玻璃器具、金属质料容器、纤维制品、固体试药、液状 白腊等均可选用本法灭菌。
干热灭菌条件一般为160~170℃*120min以上、170~180℃*60min以上或250℃*45min
以上，也可选用其他温度和时刻参数。应确保物品灭菌后的SAL《10-6。干热 过度杀灭后物品的SAL应《10-12，此时物品一般无需进行灭菌前污染微生物的 测定。250℃*45min的干热灭菌也可除掉无菌产品包装容器及有关出产灌装用具 中的热原物质。
选用干热灭菌时，被灭菌物品应有恰当的装载办法，不能摆放过密，以确保灭菌的有用性和均一性。
干热灭菌法应承认灭菌柜中的温度散布契合设定的规范及断定**冷点方位等。 常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子（Spores of Bacillus subtilis ）。细菌内毒素 灭活验证实验是证明除热原进程有用性的实验。一般将小于1000单位的细菌内 毒素参加待去热原的物品中，证明该去热原工艺能使内毒素**少下降3个对数 单位。细菌内毒素灭活验证实验所用的细菌内毒素一般为大肠埃希菌内毒素 (Escherichia coli endoxin )。 三、湿热灭菌法
本法系指将物品置于
压力蒸汽灭菌器内运用高压饱满蒸汽、过热水喷淋等手法使微 生物菌体中的蛋白质、核酸发作变性而杀灭微生物的办法。该法灭菌能力强， 为热力灭菌中**有用、运用**广泛的灭菌办法。药品、容器、培养基、无菌 衣、胶塞以及其他遇高温文潮湿不发作改变或损坏的物品，均可选用本法灭 菌。流转蒸汽不能彻底杀灭细菌孢子，一般可作为不耐热无菌产品的辅佐灭 菌手法。
湿热灭菌条件一般选用121℃*15min、121℃*30min、或116℃*40min的程序，也可 选用其他温度和时刻参数，但有必要确保物品灭菌后的SAL《10-6。对热安稳的物 品，可选用过度杀灭法，其SAL应《10-12。热安稳性较差产品的规范灭菌时刻 F0［指灭菌温度为121℃，生物指示菌的耐热参数D值为1分，灭菌温度系数Z值 为10.0℃时的规范灭菌时刻（121℃下核算的微生物等效灭活率）］一般不低于 8min。如产品的热安稳性很差时，可答应湿热灭菌的F0低于8，此情况下，应在 出产全进程中，对产品中污染的微生物严加监控，并采纳各种办法下降微生物 污染水平，确保被灭菌产品到达无菌确保要求。
选用湿热灭菌时，被灭菌物品有恰当的装载办法，不能摆放过密，以确保灭 菌的有用性和均一性。
湿热灭菌法应承认灭菌柜在不同装载时可能存在的冷点。当用生物指示剂进 一步承认灭菌作用时，应将其置于冷点处。本法生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆 菌孢子（spores of Bacillus stearothermophilus）。 四、气体灭菌法
本法系指用化学消毒剂构成的气体杀灭微生物的办法。常用的化学消毒剂有 环氧乙烷、气态过氧化氢、甲醛、臭氧（O3）等，本法适用 于在气体中安稳的 物品灭菌。选用气体灭菌法时，应注意灭菌气体的可燃可爆性、致畸性和残留 毒性。
本法中**常用的气体是环氧乙烷，一般与80%~90%的惰性气体混合运用，在 充有灭菌气体的高压腔室内进行。该法可用于医疗器械，塑料制品等不能选用 高温灭菌的物品灭菌。含氯的物品及能吸附环氧乙烷的物品则不宜运用本法灭 菌。
选用环氧乙烷灭菌时，灭菌柜内的温度、湿度、灭菌气体浓度、灭菌时刻是 影响灭菌作用的重要因数。可选用下列灭菌条件： 温度 （54±10）℃ 相对湿度（60±10）% 灭菌压力 8*10〈5〉Pa 灭菌时刻 90min
灭菌条件应予验证 灭菌时，将灭菌腔室先抽成真空，然后通入蒸汽使腔室 内到达设定的温湿度平衡的额定值，再通入通过滤和预热的环氧乙烷气体。灭 菌进程中，应紧密监控腔室的温度、湿度、压力、环氧乙烷浓度及灭菌时刻。 必要时运用生物指示剂监控灭菌作用。本法灭菌程序的操控具有必定难度，整 个灭菌进程应在技术娴熟人员的监督下进行。灭菌后，应采纳新鲜空气置换， 使残留环氧乙烷和其他易挥发性残留物散失。并对灭菌物品中的环氧乙烷残留 物和反响产品进行监控，以证明其不超越规则的极限，避免发作毒性。
选用环氧乙烷灭菌时，应进行走漏实验，以承认灭菌腔室的密闭性。灭菌程 序承认时，还应考虑物品包装资料和灭菌腔室中物品的摆放办法对灭菌气体的 分散和浸透的影响。生物指示剂一般选用枯草芽孢杆菌孢子（spores of Bacillus subtilis)。 五、过滤除菌法
本法系运用细菌不能通过细密具空滤材的原理以除掉气体或液体中微生物的 办法。常用于热不安稳的药品溶液或质料的除菌。
除菌过滤器选用孔径散布均匀的微孔滤膜作过滤资料，微孔滤膜分亲水性和 疏水性两种。滤膜质料依过滤物品的性质及过滤目的而定。药品出产中选用的 除菌滤膜孔径一般不超越0.22um。过滤器不得对被滤过成分有吸附作用，也不能 释放物质，不得有纤维掉落，禁用含石棉的过滤器。滤器和滤膜在运用前应进 行洁净处理，并用高压蒸汽进行灭菌或作在线灭菌。替换种类和批次应先清洗 滤器，再替换滤膜。
过滤进程中无菌确保与过滤液体的初始生物负荷及过滤器的对数下降值LRV（ log reduction value )有关。LRV系指规则条件下，被过滤液体过滤前的微生物数量 与过滤后的微生物数量比的常用对数值。即：
LRV =lgN0-lgN 式中 N0为产品除菌前的微生物数量； N为产品除菌后的微生物数量。
LRV用于表明过滤器的过滤除菌效率，对孔径为0.22um的过滤器而言，要求每 1cm2有用过滤器面积的LRV应不小于7。因而过滤除菌时，被过滤产品总的污染 量应操控在规则的极限内。为确保过滤除菌作用，可运用两个过滤器串连过滤， 或在灌装前用过滤器进行再次过滤。
在过滤除菌中，一般无法对全进程中过滤器的要害参数（滤膜孔径的巨细及 散布，滤膜的完整性及LRV）进行监控。因而，在每一次过滤除菌前后均应作 滤器的完整性实验，即气泡点实验或压力保持实验或气体分散流量实验，承认 滤膜在除菌过滤进程中的有用性和完整性。除菌过滤器的运用时刻应进行验证， 一般不该超越一个工作日，不然应进行验证。
过滤除菌法常用的生物指示剂为缺点假单胞菌（Pseudomonas diminuta)。 通过过滤除菌法到达无菌产品应紧密监控其出产环境的洁净度，建议在无菌 环境下进行过滤操作。相关的设备、包装容器、塞子及其他物品应选用恰当的 办法进行灭菌，并避免再污染。 六、环氧乙烷灭菌法
环氧乙烷又叫氧化乙烯，在低温下为无色液体，具有芳香醚味，沸点为10.8℃，嗅阈值为760 mg/m～1064mg/m，密度为1.52；环氧乙烷易燃易爆，其**低焚烧浓度为3%。环氧乙烷气体穿透力强。
环氧乙烷气体灭菌力强、灭菌谱广，可杀灭各种微生物包含细菌芽孢，属灭菌剂。 环氧乙烷不损害灭菌的物品且穿透力很强，故大都不宜用一般办法灭菌的物品均可用环氧乙烷消毒和灭菌。例如，电子仪器、光学仪器、医疗器械、书籍、文件、皮裘、棉、化纤、塑料制品、木制品、陶瓷及金属制品、内镜、透析器和一次性运用的治疗用品等。环氧乙烷是现在**主要的低温灭菌办法之一。
1、环氧乙烷灭菌程序需包含预热、预湿、抽真空、通入气化环氧乙烷到达预订浓度、保持灭菌时刻、清除灭菌柜内环氧乙烷气体、解析以去除灭菌物品内环氧乙烷的残留。
2、环氧乙烷灭菌时可选用100%纯环氧乙烷或环氧乙烷和二氧化碳混合气体。禁止运用氟利昂。
3、解析可以在环氧乙烷灭菌柜内继续进行，也可以放入专门的通风柜内，不该选用自然通风法。反复输入的空气应通过高效过滤，可滤除≥0.3um粒子99.6%以上。
4、环氧乙烷残留主要是指环氧乙烷灭菌后留在物品和包装资料内的环氧乙烷和它的两个副产品氯乙醇乙烷和乙二醇乙烷；触摸过量环氧乙烷残留可引起病人灼伤和刺激。环氧乙烷残留的多少与灭菌物品资料、灭菌的参数、包装资料和包装巨细、装载量、解析参数等有关。聚氯乙烯导管在60℃时，解析8h；50℃时，解析12h。有些资料可缩短解析时刻，如金属和玻璃可当即运用，有些资料需延伸解析时刻如内置起搏器。5)环氧乙烷排放: 医院环氧乙烷排放**大气，装置时要求: 有必要有专门的排气管道体系，排气管资料有必要为环氧乙烷不能通透如铜管等。距排气口7.6m范围内不得有任何易燃物和建筑物的入风口如门或窗；若排气管的笔直部分长度超越3m时有必要加装集水器，勿使排气管有洼陷或回圈形成水气聚积或冬天时结冰，堵塞管道；排气管应导**室外，并于出口处回转向下，以避免水气留在管壁或形成管壁堵塞；有必要请专业的装置工程师，并结合环氧乙烷
灭菌器出产厂商的要求进行装置。如环氧乙烷向水中排放，整个排放体系(管道，水槽等)有必要密封，不然很多带热的环氧乙烷会由水中溢出，污染周围的工作环境。 七、臭氧灭菌法
臭氧是一种强氧化剂，灭菌进程属生物化学氧化反响。O3灭菌有以下3种形式： 1.臭氧能氧化分解细菌内部葡萄糖所需的酶，使细菌灭活逝世。
2.直接与细菌、病毒作用，损坏它们的细胞器和DNA、RNA，使细菌的推陈出新受到损坏，导致细菌逝世。
3.透过细胞膜安排，侵入细胞内，作用于外膜的脂蛋白和内部的脂多糖，使细菌发作通透性畸变而溶解逝世
臭氧灭菌的速度和作用是**的，它的高氧化复原电位决议它对氧化、脱色、除味方面的广泛运用，有人研究指出，臭氧溶解于水中，简直可以杀水中全部对人体有害的物质，比如铁、锰、铬、硫酸盐、酚、苯、氧化物等，还可分解有机物及灭藻等。
臭氧消毒灭菌办法与惯例的灭菌办法比较具有以下特色：
（1）高效性。臭氧消毒灭菌是以空气为煤质，不需要其他任何辅佐资料和添加剂。所体包容性好，灭菌彻底，同进还有很强的除霉、腥、臭等异味的功用。
（2）高洁净性。臭氧快速分解为氧的特征，是臭氧作为消毒灭菌的独特优点。臭氧是运用空气中的氧气发作的，消毒进程中，多余的氧在30分钟后又结组成氧分子，不存在任何残留物，解决了消毒剂消毒办法发作的二次污染问题，一起省去了消毒完毕后的再次清洁。
（3）方便性。臭氧
灭菌器一般装置在洁净室或者空气净化体系中或灭菌室内（如臭氧灭菌柜，传递窗等）。根据调实验证的灭菌浓度及时刻，设置灭菌器的按时刻敞开及运转时刻，操作运用方便。
（4）经济性。通过臭氧消毒灭菌在许多制药职业及医疗卫生单位的运用及运转比较，臭氧消毒办法与其他办法比较具有很大的经济效益及社会效益。在当今工业快速发展中，环保问题特别重要，而臭氧消毒却避免了其他消毒办法发作的二次污染。
