玻璃器皿的准备和灭菌

试剂、试剂盒
消毒剂(次氯酸盐)清洁剂
仪器、耗材
浸泡池试管刷不锈钢篮子铝箔无菌指示器无菌指示胶带或塞灭菌烤箱
实验步骤
一、玻璃器皿的收集和清洗

1. 玻璃器皿用后要立即将其收集到含有消毒剂(次氯酸盐,用清洁剂稀释,**少应含有300 μg/g 的氯,如常规用的次氯酸钠)
的清洁剂(如,7× 或Decon)中。在浸泡或清洗前绝不能让玻璃器皿变干,否则会非常难清洗。

2. 在清洁剂中浸泡过夜。

3. 漂洗:

(a) 次日早,用试管刷手工刷洗或机器刷洗玻璃器皿,自来水冲洗 4 次后用去离子水冲洗 3 次。保持水流喷射非常有必要,否则每次都要将瓶子装满后再倒空。将许多瓶子固定在篮子中会使冲洗速度加快。

(b) 机器清洗不需要清洁剂。如果接一个龙头,则可减少两次自来水冲洗和一次去离子水冲洗的过程。

4 . 在彻底冲洗之后,将瓶子倒置在不锈钢篮子(盛放漂洗过的玻璃器皿然后晾干)中烘干。

5 . 冷却后用铝箔封口保存。

二、玻璃器皿的消毒

1. 在玻璃器皿上贴上小正方形的无菌指示胶带(这与高压灭菌器中的无菌指示胶带不同 ,因为烤箱中的温度更高。大多数高压灭菌器中的无菌指示胶带会烤焦,黏合剂中的易爆炸成分就会残留在烤箱和玻璃器皿中。)或其他的指示标签,并写上日期。

2. 将玻璃器皿放人烤箱(在有风扇的情况下温度可以达到160°C ,宜使用可记录温度计和易弯曲的探针)中,烤箱应有可循环空气的风扇,并将温度设定在 160°C 。

3. 确保烤箱的中央温度达到160°C:

(a) 将一个无菌指示器(Alpha Medical 适用于干热或蒸汽消毒,Thermalog 指示器只适用于蒸汽消毒)放人瓶中或其他器皿内,置于烤箱中央。

(b) 如果用可记录的麵计,将感应部分放入瓶中或其他器皿内,符于烤箱中央。

(c) 不要将物品堆得过紧,要留出热空气对流的空间。

4. 将烤箱盖好,检杳温度旋钮是否在 160°C ,用胶带将烤箱封好并按预定时间保持 1h (或用自动锁和自动记录仪)。

5. 1h 后将电源关掉,不开箱冷却。如果有自动计时器则非常方便,因为它晚上能自动断电,次日早就可以继续实验。这样做可使冷却在无菌的环境中进行,也使白天产生的热量降低到**少。

6 . 消毒的玻璃器肌要在 24~48h 内使用。

收起 
注意事项
1. 有机物要放在烤箱外面。不要用纸质的胶带或包装材料,除非你能确定其加热时不会产生爆炸性物质。这些物质**终会留在烤箱中,加热时会产生气味,有的会残留在消毒过的玻璃器皿中。

2. 用 121°C高压灭菌20min,要经过一个前真空和后真空的循环,可以将瓶子的螺口盖松开或用铝箔包住口后再用高压灭菌胶带粘住。待冷却后,再将松开的瓶盖拧紧。在高压灭菌的过程中,瓶盖应拧得非常松(拧一圈即可),这样做是为了让蒸汽进人瓶中,也能阻止垫片(如果有)被瓶盖吸住而堵住瓶口。在高压灭菌器的灭菌过程中如果瓶口被堵住,会导致灭菌不完全。不幸的是,在高压灭菌过程中经常会出现薄雾,在薄雾蒸发的过程中会在瓶中留有残留物。同时瓶子在密封之前,冷却的时候也可能被未消毒的空气所污染。干热灭菌相对好一些,因为它可以使瓶子在移动之前在烤箱中直接冷却。