灭菌方法的设计课程设计

摘要: 
   培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不同的需求,采用不同的方法,如培养基灭菌一般采用湿热灭菌,空气则采用过滤除菌。 关键词:灭菌  方法  技术 
   在医学中微生物的杀灭叫灭菌;灭菌的结果是无菌,也就是说指定样品经过一系列处理后不含任何微生物。例如手术器械的消毒过程等。微生物的灭菌如果用加热方法与温度有关外还和作用时间有关。100度温度下加热30分左右时候基本上大部分微生物会被杀灭,但是细菌的芽孢却例外,能耐高温。 
   在医学实践中,常采用物理、化学及生物的方法,清除环境中的微生物,以切断传播途径,保护易感人群,从而控制或消灭传染病。现将有关术语介绍如下: 
   消毒 (disinfection) 杀灭物体上病原微生物的方法,称为消毒。用于消毒的化学药品称消毒剂。常用浓度下的消毒剂,只对细菌繁殖体有效,对其芽胞则需提高消毒剂浓度和延长作用时间才能杀灭。 
   灭菌 (sterilization) 杀灭物体上所有微生物,包括细菌芽胞的方法,称灭菌。 
   无菌 (asepsis) 物体中无活的微生物存在,称为无菌。防止微生物进入机体或物体的方法,称为无菌操作或无菌技术。进行微生物学实验、外科手术、换药、注射时,均需严格遵守无菌操作规定。 
   防腐 (antisepsis) 防止或抑制微生物在物体中生长繁殖的方法,称防腐。用于防腐的化学药品称防腐剂。使用同一种化学药品低浓度时为防腐剂,高浓度则为消毒剂。 
卫生清理 (sanitation) 将微生物污染了的无生命物体表面还原为安全水平的处理过程。例如医院内的病房、病人使用过的用具、布类的卫生处理等。 一、物理消毒灭菌法 
   物理消毒灭菌法是医学实践中常用的方法,通常包括热力、紫外线、辐射、超声波和滤过除菌等。 (一)热力灭菌法 
    热灭菌法 利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。 
   热力能破坏微生物的蛋白质和核酸,使蛋白质变性凝固,核酸解链崩裂,从而导致其死亡。 
   1.干热灭菌法 直接利用火焰将微生物烧死(如烧接种环、载玻片和试管口等)。不能用火焰灭菌的物品则利用热空气灭菌,将物品放在烘箱中加热到160~170℃,持续90分钟,此法适用于玻璃、金属和木质的器皿。 
   (1)焚烧与烧灼 焚烧仅用于废弃的被病原微生物污染的物品、垃圾、人及动物尸体等。烧灼用于微生物实验室的接种环、金属器械、试管口、瓶口等的灭菌。 
   (2)干烤 使用干烤箱灭菌,一般需加热**160℃~170℃经2h,可达到灭菌的目的。适用于玻璃器皿、瓷器、金属物品等的灭菌。    2.湿热消毒灭菌法
湿热灭菌 以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。巴氏灭菌法就是湿热灭菌,此法有两种方式,①低温长时间处理:在61.7~62.8℃下处理30分钟;②高温短时间处理:在71.6℃或略高温度下处理15分钟。在上述诸法中,以蒸气加压灭菌效果**好,可用常压蒸气灭菌,也可在高压蒸气锅中(一般使用1千克/厘米2)灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。但对某些易被高压破坏的物质,如某些糖或有机含氮化合物,宜在0.6千克/厘米2压力下(110℃)灭菌15~30分钟。 
   (1)巴氏消毒法 法国学者巴斯德创用而得名。主要以较低温度杀灭病原菌或特定微生物,而使物品中不耐热成分不被破坏。此法有两种:一种方法是加热61.1℃~62.8℃、30min;另一种方法是加热71.7℃、15~30s。现在人们多用后种方法对牛奶进行消毒。    (2)煮沸法 煮沸100℃、5~10min,可杀死细菌繁殖体。芽胞则需要煮沸1~2h。常用于注射器、食具与饮水的消毒。 
   (3)流通蒸气法 用阿诺(Arnold)蒸锅或普通蒸笼,加热100℃、15~30min,可杀灭细菌的繁殖体。若将消毒后的物品放入37℃孵箱培养,使芽胞发育成繁殖体,次日再蒸一次,如此连续三次以上,可达到灭菌效果,这种方法称为间歇灭菌法。常用于不耐高温的物品,如糖类、血清和鸡蛋培养基等的灭菌。 
   (4)高压蒸气灭菌法 是一种迅速而有效的灭菌方法。使用高压蒸气灭菌器,利用加热产生蒸气,随着蒸气压力不断增加,温度随之升高,通常压力在103.4kPa(相当旧制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )时,器内温度可达121.3℃,维持15~30min,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。此法常用于一般培养基、生理盐水、手术器械及敷料等耐湿和耐高温物品的灭菌。 
(二)紫外线与电离辐射